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文獻(xiàn)解讀| 負(fù)載I型膠原蛋白脂質(zhì)體的制備、表征及體外皮膚滲透性評價(jià)
發(fā)布:2024-10-29 來源:膠原蛋白知識課堂 瀏覽:658


2024.10.29

獻(xiàn)

負(fù)載I型膠原蛋白脂質(zhì)體的制備、

表征及體外皮膚滲透性評價(jià)

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NEWS

為什么愛丁娜選擇使用脂質(zhì)體技術(shù)包裹I型膠原蛋白應(yīng)用到化妝品中?2023年發(fā)表的這篇論文提供了詳細(xì)的解析。

01

科普

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(1)、什么是I型膠原蛋白

I型膠原蛋白的相對分子質(zhì)量約為 300 kDa,主要存在于皮膚、肺、骨骼和結(jié)締組織中。I型膠原蛋白是一種三股螺旋結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),由兩條 α1肽鏈和一條 α2肽鏈纏繞形成,每條肽鏈由(Gly-XY)n組成,其中X和Y主要代表脯氨酸和羥脯氨酸。其低免疫原性、良好的生物相容性和生物降解性等多種特性,I型膠原蛋白在生物產(chǎn)業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用,如組織再生、藥物、食品和化妝品。

(2)、什么是脂質(zhì)體包裹技術(shù)

脂質(zhì)體是由磷脂雙分子層組成的封閉囊泡(通常直徑為50–500 nm),廣泛用于將 DNA、疫苗和藥物等多種成分遞送至體內(nèi),在藥物和化妝品領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。負(fù)載魚源肽的脂質(zhì)體能改善抗氧化性能和皮膚滲透特性。

(3)、什么是膠原蛋白脂質(zhì)體

是將膠原蛋白包載于脂質(zhì)體內(nèi)水相,粒徑在100 nm左右,不僅提高了I型膠原蛋白的溶解性,還在一定程度上改善了皮膚的滲透性。愛丁娜的護(hù)膚品系列,使用國家首創(chuàng)專利技術(shù)-【一種決明子復(fù)方膠原脂質(zhì)體及其應(yīng)用】,實(shí)現(xiàn)大分子功效護(hù)膚品經(jīng)涂抹使用后可自主吸收。


02

為什么使用該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用到化妝品當(dāng)中

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   論文首先從I型膠原蛋白優(yōu)勢進(jìn)行介紹,相對分子質(zhì)量約為300 kDa,具有完整的三股螺旋結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),由于其低免疫原性、良好的生物相容性和生物降解性等多種特性,在生物產(chǎn)業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用;盡管|型膠原蛋白具有許多優(yōu)點(diǎn),但低生物利用度和低吸收效率仍然限制了其應(yīng)用;愛丁娜針對這一挑戰(zhàn),發(fā)現(xiàn)使用脂質(zhì)體包封膠原蛋白可以提高其生物利用度和吸收效率,解決了這一難題,將大分子包裹在脂質(zhì)體內(nèi),良好的改善了抗氧化性能和皮膚滲透特性,與單純的使用I型膠原蛋白涂抹皮膚相比,負(fù)載膠原蛋白的脂質(zhì)體更容易穿透皮膚,直達(dá)肌底。

03

膠原蛋白脂質(zhì)體的完整性

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圖1膠原蛋白及其脂質(zhì)體的 SDS-PAGE 電泳圖(M-蛋白 Marker;1-未破膜的空白脂質(zhì)體,2-破膜后的空白脂質(zhì)體,3-超純水+Triton X-100;4、5-破膜后的膠原蛋白脂質(zhì)體,6-未破膜的膠原蛋白脂質(zhì)體,7-膠原蛋白溶液)。

   通過聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)測定了膠原蛋白脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)完整性。在制備過程中未觀察到蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)或構(gòu)象不穩(wěn)定性,并且蛋白質(zhì)從脂質(zhì)體中釋放出來。無論膜是否破裂,空白脂質(zhì)體均無條帶,而膠原蛋白包被的脂質(zhì)體在膜未破裂時有淺條帶,因?yàn)椴⒎撬心z原蛋白都被覆蓋。破膜的膠原蛋白脂質(zhì)體條帶與膠原蛋白溶液的條帶之間沒有顯著差異,也沒有其他明顯的條帶,表明脂質(zhì)體覆蓋的膠原蛋白是完整的。此外,破膜的膠原蛋白脂質(zhì)體條帶的深度比膠原蛋白溶液的淺,這與包封率測量中的結(jié)果一致。

04

使用脂質(zhì)體包裹后的細(xì)胞毒性檢測

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圖2膠原脂質(zhì)體對BV2細(xì)胞活力的影響

   為了測試膠原蛋白脂質(zhì)體的生物安全性,我們使用BV2 細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞活力測試。結(jié)果顯示了膠原蛋白脂質(zhì)體對 BV2 細(xì)胞存活率的影響,表明不同濃度的膠原蛋白脂質(zhì)體導(dǎo)致BV2 細(xì)胞存活率均大于 95%,且細(xì)胞存活率之間無顯著差異。這些結(jié)果表明,制備的膠原蛋白脂質(zhì)體在生物學(xué)上是安全的,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為膠原蛋白脂質(zhì)體在化妝品和制藥領(lǐng)域作為天然安全原料的應(yīng)用提供了一定的參考。

05

膠原蛋白和膠原蛋白脂質(zhì)體的滲透性

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圖 3不同溫度下膠原蛋白及其脂質(zhì)體的累積透過曲線;(a)舌解魚皮膚;(b) 裸鼠皮膚;(C) BALB/c 小鼠正常皮膚;(d) BALB/c 小鼠損傷皮膚。

    圖中顯示了膠原蛋白和膠原蛋白脂質(zhì)體在不同動物皮膚中24 小時內(nèi)的累積滲透量 (以每平方厘米表示)。在相同溫度 (32℃)下,BALB/c 小鼠正常皮膚組、BALB/c 小鼠損傷皮膚組和舌島魚皮膚組中膠原蛋白脂質(zhì)體的累積滲透量分別是膠原蛋白溶液的1.3、1.5 和1.2倍。測試表明,在相同溫度下負(fù)載膠原蛋白的脂質(zhì)體比膠原蛋白本身更容易穿透皮膚。

06

總結(jié)

    膠原蛋白在pH=8 時溶解度最低,這是膠原蛋白的等電點(diǎn)。在上述結(jié)果的指導(dǎo)下.首次制備了牛|型膠原蛋白納米脂質(zhì)體。觀察表明:

① 膠原蛋白脂質(zhì)體呈球形,具有平均直徑和高穩(wěn)定性。物理穩(wěn)定性研空表明,低溫(4℃)延長了膠原蛋白脂質(zhì)體的儲存時間,SDS-PAGE 分析表明膠原蛋白完全包封在脂質(zhì)體中。

② MTT(細(xì)胞毒性檢測)測定表明膠原蛋白脂質(zhì)體在生物學(xué)上是安全的。

③ 滲透性研究表明,與膠原蛋白本身相比,負(fù)載膠原蛋白的脂質(zhì)體更容易穿透皮膚,并且它們增加了皮膚中膠原蛋白的滯留量,從而延緩膠原蛋白的釋放。

④ 通過脂質(zhì)體包封膠原蛋白以提高其生物利用度和吸收效率的可行性,從而為研空由于水溶性差和皮膚滲透性差而不適合外用的蛋白質(zhì)制劑提供了參考。

   愛丁娜運(yùn)用全國首創(chuàng)專利生產(chǎn)技術(shù)為求美者打造高品質(zhì)系列產(chǎn)品,實(shí)現(xiàn)居家護(hù)理也能達(dá)到醫(yī)美的功效,既是對美麗的承諾,也是對美學(xué)的致敬。未來愛丁娜將不斷追求卓越,為大眾的美學(xué)事業(yè)奉獻(xiàn)自己的力量。

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